Monkeypox tanı yöntemleri
Monkeypox virüs (MPXV), çiçek ve vaccinia tüm Orthopoxvirus ait cins. Monkeypox virüs ağırlıklı iletilir insanlar tarafından kemirgenler, primates ve diğer vahşi hayvanlar, ve sınırlı insan vardır-için-İnsan iletim, neden bir nadir viral zoonotic hastalığı-monkeypox. Eylül 1st , 1970, ilk insan durumlarda MPXV kongo içinde Basankusu hastane de tespit vardı. Monkeypox virüs ağırlıklı iletilir insanlar tarafından kemirgenler, primates ve diğer vahşi hayvanlar, ve sınırlı insan vardır-için-İnsan iletim, neden bir nadir viral zoonotic hastalığı-monkeypox. Klinik belirtileri monkeypox çiçek benzer vardır, ama belirtiler hafif. Monkeypox ağırlıklı uzaktan alanlar oluştu merkezi ve batı afrika, nerede tropikal yağmur ormanları yakın olduğunu. Adaptasyon ile, insanlar için MPXV yavaş yavaş gelişti içine iki clades: orta afrika şube (kongo havzası) ve batı afrika şube. Bunlar arasında, kongo havzası şube güçlü virülans ve geçirgenliğini vardır.
Giriş MPXV
Monkeypox virüs bir zarflı çift sarmallı DNA virüs, bu çok bağlıdır konak cep DNA ve RNA çoğaltma, ve ev sahibi çoğaltabilirsiniz sitoplazma. Virüsler benzer aynı cins, MPXV çok muhtemeldir çoğaltmak için morphologically farklı hücre içi olgun virüs (IMV) ve hücre dışı zarflı virüs (EEV) ev sahibi sitoplazma. IMVs var bir sağlam fiziksel yapısı kolaylaştırır iletim arasında barındıran, daha kırılgan ise EEVs ev sahibi tarafından zarflı ve sınırı bağışıklık gümrükleme vardır. Bu nedenle, EEVs virüs için daha uygundur-için-cep iletim. MPXV etkili bir bulaştırmak insan birincil monositler, ortadan kaldırarak yerel T cep CD4 inhibe ve CD8 T tarafından yanıtları hücre aktivasyonu, böylece kaçınarak sistemik immunosuppression ve bağışıklık izleme.
Klinik tanı monkeypox virüs
En iyi teşhis örnekleri için monkeypox gelen deri lezyonları: sıvı kesecikler ve püstüller gelen, ve kuru kabuklar. Lezyon örnekleri kuru saklanır, steril tüpler (VTM gibi) ve muhafaza soğuk. Klinik tanı monkeypox düşünün gerekir diğer döküntü bozuklukları gibi chickenpox, kızamık, bakteriyel cilt enfeksiyonları, uyuz, frengi, ve ilaç-ilgili alerji. Lymphadenopathy hastalığı erken dönemlerinde olabilir sadece klinik özelliği ayıran monkeypox gelen chickenpox veya çiçek.
1. Elektron mikroskop biyopsi
Elektron mikroskobu altında, MPXV oldu tuğla şeklinde sitoplazma içinde, yanal organları ile, ve merkezi çekirdeği yaklaşık 200-300 nm uzun oldu. Beri OPV characterizations vardır morphologically ayırt edilemez, bu yöntemi tanı teyit edemez, ancak virüs öneririz aittir Poxviridae cins.
2. Gen algılama
2.1. Gerçek zamanlı floresan kantitatif PCR
Rutin algılama MPXV DNA üzerinde klinik örnekleri ve MPXV-enfekte cep kültürler, PCR ile veya gerçek zamanlı PCR yöntemi. Algılama gerçekleştirmek için tavsiye edilir bir biosafety seviye 3 tesisi. Gerçek zamanlı PCR yöntemi olmalıdır tespit etmek için kullanılan dış zarf proteini gen (B6R), DNA polimeraz gen, korunmuş bölge E9L, DNA-bağımlı RNA polimeraz subunit 18, rpo18 ve F3L gen.
2.2. Kısıtlama uzunluğu fragmanı polimorfizm (RFLP)
PCR veya kısıtlama uzunluğu fragmanı polimorfizm (RELP) MPXV DNA tespiti için de kullanılabilir, ama RFLP olduğunu zaman alıcı ve gerektirir virüs kültür. RFLP of PCR ürünleri de gerektirir sindirim tarafından takip jel elektroforez, hangi olmayabilir en iyi yaklaşım klinik ayarları nerede hız, hassasiyet, ve özgüllük kritik vardır.
2.3. Nesil sıralama teknolojisi (NGS)
Tüm-genom NGS ile sıralama yöntemi kalır ayırt için altın standart MPXV ve diğer orthopoxvirus (OPV) karakterizasyonu, ama teknoloji pahalı olduğunu ve mansap işleme sıralama veri gerektirir muazzam hesaplamalı güç. Bu nedenle, NGS olmayabilir uygun bir yaklaşım içinde kaynak-sınırlı ülkeler alt-Saharan afrika. Gerçek zamanlı PCR hala içinde MPXV rutin tanı için tercih edilen genetik test teknolojisi ama bu ile desteklenmiş olmalıdır yerinde genom sıralama teknolojisi. Gibi Oxford Nanopore MinION sağlar, gerçek-zaman viral genom veri, kanıta dayalı için gerekli olan epidemiyolojik müdahale.
3. Immuno deneyi
Monkeypox virüs bağışıklık deneyi ağırlıklı enzim-bağlantılı immunosorbent deneyi (ELISA) algılamak için IgG/IgM antikorlar ve immunohistochemical algılama viral antigens. Immunochemical analizi MPXV antikorlar ayırt olabilir herpes virüs. Antiviral antikorlar ve T-cep yanıtları artırmak için victimized olmuştur iken hastalığı başlangıçlı, monkeypox ile virüs IgM ve IgG tespit serum etrafında 5 gün sonra döküntü ve bu başlangıcı daha sonra 8 gün. Mümkün MPXV enfeksiyon teşhis edilmelidir eğer IgM ve IgG antikorlar mevcut serum of unvaccinated bireyler ile bir döküntü ve şiddetli hastalık geçmişi. Olumlu bir IgM ELISA testi gösterir son MPXV maruz kalma, iken olumlu bir IgG test gösterir bireysel olmuştur daha önce maruz MPXV vaccination aracılığıyla veya doğal enfeksiyon. Hem IgM ve IgG varlığı bir örnek ile doğal enfekte bireyler için önce vaccination veya pozlama gösterir MPXV. Ancak, orthopoxviruses serologically çapraz-reaktif vardır, ve antijen ve antikor tahliller vermeyin onay monkeypox özgüllük, ama serological için mümkün olabilir test MPXV-endemik alanlarda.
RReferans noktası:
[1] Sarah Keasey, Christine Pugh, Alexander Tikhonov, et al. Proteomic temelinde antikor yanıt Monkeypox virüs enfeksiyonu içinde incelenir Cynomolgus Macaques ve bir karşılaştırma için İnsan çiçek vaccination [J]. Plos tek, 2010, 5(12): e15547.
[2] Emmanuel Alakunle, Ugo Moens, Godwin Nchind, et al.Monkeypox virüs nijerya: enfeksiyon biyoloji, epidemiyoloji, ve evrim [J]. Virüsler, 2020, 12(11):1257.
